小鼠肾脏单细胞活率97%如何实现？JX-DLDXB转刀款制备方案拆解

上海净信JX-DLDXB系列：双向机械切割 + 肾脏专用解离酶，兼顾解离效率与细胞活性

一、产品与方案概览

肾脏，是单细胞制备领域公认的高难度组织：结构致密、血管丰富、细胞类型多样（肾小球、肾小管、间质细胞等），再加上大量红细胞干扰，稍有不慎就会出现细胞破损率高、碎片多、活率低的问题。机械力过强，细胞容易被"打碎"；酶解过度，表面标记丢失、细胞活性下降——如何在解离效率与细胞活性之间找到平衡点，是肾脏单细胞实验绕不开的课题。

近期，我们使用上海净信转刀款JX-DLDXB系列单细胞悬液制备仪，配合肾脏专用解离酶，完成了小鼠肾脏组织的单细胞悬液制备，经AOPI染色检测，本实验条件下活细胞率可达97%。本文将该实验的完整流程和关键要点进行拆解。

 

二、实验案例速览

项目	内容
组织样本	小鼠肾脏
制备仪器	净信转刀款JX-DLDXB系列单细胞悬液制备仪
解离试剂	肾脏专用解离酶（配套终止液、去碎片剂）
制备方式	双向机械切割 + 酶协同解离
活性检测	AOPI染色，细胞计数仪检测
实验结果	活细胞率 97%

一个看似常规的实验，背后是仪器、酶、流程三个环节的协同优化，接下来逐一拆解。

 

三、全流程拆解：从肾脏组织到单细胞悬液

1. 实验准备

预制碎冰，在低温条件下解冻单细胞解离酶和酶解终止液；仪器开机，加热套提前预热；预冷PBS，准备无菌眼科剪、镊子、无菌细胞筛、离心管、离心机等耗材并预冷。

2. 组织收集与清洗

小鼠断颈处死，使用仪器配套灌流仪灌流后，立即取出肾脏置于冷的PBS中（建议取材后及时处理，如需放置更长时间请使用组织保存液）。用预冷PBS反复清洗，去除血液、坏死组织等杂质，称重记录。

3. 剪碎组织

将组织移入配套消化管，剪为细小组织碎块，尽量剪至糊状。

4. 仪器酶解（核心环节）

将消化管卡入仪器凹槽，安装加热套管，设置好参数，点击启动。消化途中可单点对应通道暂停取样查看（单次暂停时间不宜过长），消化达标即可提前终止程序，缩短酶解时长。

5. 终止与过滤

待组织完全解离后，先后经适宜孔径细胞筛过滤，加入终止液，全程冰上操作；低温条件下离心，弃上清。

6. 去除碎片

先加适量PBS重悬，再加入去碎片剂重悬；低温条件下适当提高离心力离心，弃上清。

7. 重悬与质检

完全培养基重悬细胞沉淀，制备单细胞悬液；AOPI染色检测：本实验条件下活细胞率97%，细胞状态良好。

 

四、高活率背后的三重保障

① 程序温和，避免"暴力解离"

肾脏组织致密，解离时必须"用力"，但用力方式决定细胞死活。JX-DLDXB系列采用双向机械切割+酶协同解离的技术路线——以温和、均匀的切割力持续作用，将组织"拆解"而非"打碎"，减少对细胞膜完整性的损伤，从源头保障活率。

② 组织特异性酶配方：肾脏专用

不同组织，细胞外基质成分差异较大。"净信"肾脏专用解离酶MJ005针对肾脏组织的细胞外基质特点定制配方，解离更具针对性、更温和，配合专用终止液、去碎片剂形成完整解决方案，减少"一刀切"酶解带来的过度消化。

③ 精细化过程控制：看得见、停得下

加热套稳定控温：为酶解提供稳定、适宜的温度环境；

单通道独立暂停取样：消化进度实时可查，单次暂停不超过30 s不影响整体；

达标即停：消化充分即可提前终止，减少过度酶解，保留细胞活性；

全流程低温护航：过滤、离心全程冰上操作，4℃低温离心，减少细胞凋亡与代谢损伤。

五、关于转刀款JX-DLDXB系列单细胞悬液制备仪

净信JX-DLDXB系列单细胞悬液制备仪，采用"双向机械切割+酶"协同解离技术路线，兼顾解离效率与细胞活性：

1. 转刀温和解离：适用于肾脏、肝脏、肿瘤等致密组织，兼顾细胞活率与得率；

2. 原位/离体灌流程序：内置灌流功能，支持肝脏门静脉原位灌流、心脏主动脉逆行灌流等应用，为血液丰富的器官提供解离方案；

3. 多通道并行：多通道设计，可同时处理多个样本，提升实验通量；

4. 标准化流程：参数可设、运行稳定，减少人为误差，实验结果可重复。

无论是肾脏、肝脏等致密实体器官，还是肿瘤、皮肤等复杂组织，JX-DLDXB系列都能提供温和、高效、可追溯的单细胞制备体验，欢迎广大科研用户在线咨询。