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12 人阅读发布时间:2026-08-29 09:38
一、临床检测中的浓缩需求
血清是临床检测最常用的标本之一,但不同待测物的浓度跨度极大。血清总蛋白约60–80 g/L,其中白蛋白与免疫球蛋白占绝对主体;而细胞因子(IL-6、TNF-α等)、炎症标志物及部分肿瘤标志物浓度多在pg/mL至低ng/mL量级,仅占总蛋白的万分之一以下。常规免疫检测方法的定量下限通常在ng/mL水平,当靶标浓度低于该范围时,检验结果只能报告“未检出”或低于定量限。
健康人血浆游离DNA(cfDNA)浓度约1–17 ng/mL;肿瘤患者循环肿瘤DNA(ctDNA)在总cfDNA中的占比,晚期可达1%–10%,早期或分子残留病灶(MRD)状态低至0.01%。《ctDNA高通量测序临床实践专家共识(2022年版)》推荐稳定检出丰度≥0.02%,并建议每次采集≥10 mL外周血。核酸提取后的洗脱体积通常为50–100 μL,模板浓度直接决定扩增与测序成功率。
将2–5 mL血清浓缩至200–500 μL,或将50–100 μL核酸洗脱液浓缩至10–20 μL,可实现5–10倍富集,使低丰度靶标跨过检测下限。许多“弱阳性”样本正是通过浓缩被重新发现。
二、浓缩流程
1. 血清分离:全血标本待充分凝固后离心,按WS/T 225-2024《临床化学检验血液标本的采集与处理》规范分离血清,避免溶血与纤维蛋白残留,做好标本标识与交接记录。
2. 真空浓缩:取2–5 mL血清(或提取后的核酸洗脱液),置于真空离心浓缩仪中,低温低压下浓缩至目标体积(蛋白检测200–500 μL,核酸10–20 μL)。运行中确认真空度达到设定值后再离开。
3. 复溶检测:以缓冲液复溶、涡旋混匀后上机检测(免疫分析、电泳或测序),确保浓缩后靶标完全回溶、浓度均一,并记录浓缩前后体积与浓度变化。
三、低温浓缩的技术优势
温度可控,保护热敏标志物:血清蛋白与核酸均不耐高温。传统氮吹浓缩常在40–60℃下进行,可能致蛋白变性或活性丢失;真空离心浓缩可在低温条件下精确控温,避免热敏标志物降解。
密闭体系,杜绝交叉污染:浓缩全程在密闭腔体内完成,溶剂蒸气经冷阱冷凝回收,既减少环境污染,也避免样本间交叉污染。
回收率高,适合微量珍贵样本:真空浓缩过程无吹溅损失,适合血清这类不可重复采集的标本,微量样本亦能实现较高回收率。
四、设备配置与操作要点
JX-ZLN系列真空离心浓缩仪转速、温度、真空度独立可调,可存储64组程序,适配不同样本的浓缩条件。可选配在线成像模块,实时观察浓缩终点,避免过度干燥。设备运行中确认真空度达到设定值后再离开,避免设备异常导致样品损失。浓缩完成后记录浓缩前后体积与浓度变化,满足GB/T 22576.1-2026对结果可溯源性的要求。