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50 人阅读发布时间:2026-07-20 15:58
一、实验背景
脾脏是免疫学研究中使用频率较高的组织之一,广泛应用于流式细胞术、单细胞测序及细胞分选等实验。然而,脾脏组织致密、含大量红细胞,传统手工制备方法(剪碎、研磨、裂红)普遍存在以下问题:操作者手法差异直接影响细胞活率,实验重复性较差;操作步骤繁琐,单次制备耗时较长;剪切过程易造成细胞碎片增多及表面抗原损伤。
针对上述问题,净信JX-DLDXB转刀款单细胞悬液制备仪提供了一套自动化的组织解离方案。本文以小鼠脾脏为样本,介绍该设备的操作流程与应用效果。
二、实验方案
2.1 样本与试剂
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项目 |
规格 |
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实验动物 |
SPF级C57BL/6小鼠,6-8周龄 |
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目标组织 |
脾脏(完整摘取) |
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解离酶 |
净信配套脾脏解离酶 |
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耗材 |
70μm细胞筛网、15mL离心管、PBS/1640培养基 |
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检测方式 |
台盼蓝染色+血球计数板 |
2.2 操作流程
Step 1 取材:脱颈处死后无菌取脾,置预冷PBS中,剥除外膜脂肪。
Step 2 装样:将脾脏转入JX-DLDXB转刀款专用消化管,加入2mL解离酶。
Step 3 上机:触控屏选择“Spleen”内置程序启动运行。程序温度37℃,全程无需人工干预。
Step 4 收样:程序结束后过70μm筛网,收集单细胞悬液,离心重悬。
三、实验结果
台盼蓝染色后显微镜观察:细胞分散均匀,少见聚团;细胞膜完整,形态圆整;红细胞碎片明显少于手工对照组。细胞计数结果显示活细胞率≥90%,单细胞得率显著高于手工对照。
四、仪器特点
1. 内置组织专属程序
设备内置脾脏、肝脏、肾脏、心脏、肿瘤、皮肤等多种组织程序,用户选择对应程序后设备自动匹配温控、转速、时间等参数,无需手动摸索条件。
2. 机械切割与酶解同步进行
采用转刀机械切割与恒温酶解同步作用的方式,可在较短时间内完成组织解离,比手工操作方法耗时缩短约50%。
3. 温控与转速闭环控制
37℃恒温孵育配合程序化转速控制,保证酶解反应在适宜条件下进行,批次间结果一致性较好。
4. 密闭消化管路
样本在封闭体系中完成解离全过程,降低样品间交叉污染及气溶胶扩散风险。
5. 多组织适用性
通过切换内置程序,同一设备可处理肝脏、肾脏、心脏、皮肤、脑、肿瘤等多种组织类型,无需另购专用设备。
五、方法对比
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对比维度 |
手工剪碎+研磨 |
净信JX-DLDXB转刀款 |
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单样本耗时 |
60-90min |
~30min |
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活细胞率 |
70-85%(手法依赖) |
≥90% |
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操作一致性 |
受操作者影响大 |
程序控制,批次差异小 |
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跨组织切换 |
需逐一摸索条件 |
触屏切换程序 |
六、适用场景
该设备适配的样本类型涵盖小鼠、大鼠、兔等常见实验动物的多种组织,包括肝脏、肾脏、心脏、皮肤、脑、肿瘤等。制备所得单细胞悬液可应用于流式细胞术、MACS磁珠分选、单细胞测序(scRNA-seq)、原代细胞培养等下游实验。
七、结语
JX-DLDXB转刀款单细胞悬液制备仪通过内置程序、机械切割与酶解同步、温控闭环等设计,将脾脏等组织的单细胞悬液制备流程标准化。单次处理时间约30分钟,活细胞率稳定在90%以上,适用于免疫学研究中脾脏样本的批量处理及相关单细胞分析实验。