单细胞悬液制备仪解决小鼠组织实验难题|肾脏篇
5553 人阅读发布时间:2025-03-24 17:29
用三组不同的解离液对小鼠肾脏进行单细胞悬液
1. 组织的获取和清洗
取荷瘤鼠的肿瘤组织,放入4℃的pbs培养皿中,将培养皿放置冰上
2. 酶消化、机械分离
(1)用剪刀将组织剪成绿豆大小,用4℃ D-Hank's液洗1次,清洗去除剪碎组织的过程中出现的组织碎片。
(2)样品管内加入200-500mg组织和消化酶,放入单细胞悬液制备仪中
(3)消化完成后,轻微震荡试管。观察消化完之后的浑浊度和颜色。并用细胞筛过滤出单细胞悬液。之后加入终止消化酶,得到单细胞悬液
3.洗涤和重悬
(1)经过初筛未裂红的
如图四
(2)如有大量红细胞污染,加入自制的红细胞裂解液裂红,样品离心后加入PBS重悬。
如图五
从组织获得存活单细胞是一个复杂过程,为降低细胞裂解和损失,处理过程难免繁琐,会存在处理时间长、细胞得率低、存活率低的问题。单细胞悬液制备仪,具有起始组织量小,时间短,细胞得率高,细胞活性高的特点。常应用于流式细胞术/单细胞测序/原代细胞培养等实验。
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单细胞悬液制备仪解决小鼠肾脏组织实验.pdf
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